溶液中待測物分子中的價電子能夠選擇性地吸收紫外或可見光,從基态躍遷到激發态,形成紫外可見吸收光譜,根據紫外可見吸收光譜中的吸收峰和摩爾吸收系數,進行定性分析。這就是化學試劑分子吸收的測定方法——分光光度法,本文對這種方法進行瞭詳細介紹。

使用自動(dòng)記錄型儀器時,可自動(dòng)掃描繪(huì)出吸收曲線。
使用非自動記錄型儀器時,在規定的波長(zhǎng)範圍時,每隔5nm~10nm測(cè)定一次吸光度,在吸收峰附近時,應每隔1nm~2nm測(cè)定一次,以波長(zhǎng)爲橫坐标,相應的吸光度爲縱坐标,繪制吸收曲線。
此方法可适用於(yú)定性分析、最大吸收波長的測(cè)定。
按産品标準的規定配制四個以上濃度成适當比例的标準溶液,以空白溶液(或溶劑)爲參比溶液,同時用空白溶液(或溶劑)的吸光度進行校正。在規定波長下,分别測定吸光度。以标準溶液濃度c爲橫坐标,相應的吸光度A爲縱坐标,繪制工作曲線,同時配制适當濃度的樣品溶液,在上述條件下測定吸光度,並(bìng)在工作曲線上查出待測物濃度(圖1),待測物的濃度應在工作曲線範圍内。該溶液濃度也可根據測定的吸光度用回歸方程法計算。此方法适用於(yú)雜質含量的測定。
按産品标準給出的方法測(cè)定。特效試劑可在規定條件下與被測(cè)物生成有色配位化合物,測(cè)定其溶液的吸光度,按标準中給出的換算系數計算含量,也可用标準樣品對照法進行計算;某些酸堿指示劑可採(cǎi)用柱層析法将雜質分離後測(cè)主體溶液的吸光度,用标準對照法計算含量。
按産(chǎn)品标準的規定條件測(cè)定。
摩爾(ěr)吸收系數E,數值以L/(cm*mol)表示,按式(2)計(jì)算:

式中:
A——吸光度的數值;c——被測(cè)物的物質的量濃度的數值,單位爲摩爾每升(mol/L);b—光路長(zhǎng)度(即吸收池厚度)的數值,單位爲厘米(cm)。
按産(chǎn)品标準規定條件測(cè)定。靈敏度可用摩爾吸收系數表示。
質量吸收系數(shù)a,數(shù)值以L/(cm*g)表示,按式(3)計(jì)算:

A——吸光度的數值;
p——被測(cè)物的質量濃度的數值,單(dān)位爲克每升(g/L);
b——光路長(zhǎng)度(即吸收池厚度)的數值,單(dān)位爲厘米(cm)。